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      培養基的概念和制備

      發布時間:

      2022-11-16

      作者:

      國內微生物培養基公司


      培養基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物試驗結果.適宜的培養基制備方法,貯藏條件和質量控制試驗是提供優質培養基的保證.
      微生物實驗室使用的培養基可按處方配制,也可使用按處方生產的符合規定的脫水培養基.
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      在制備時,應選擇質量符合要求的脫水培養基或按單獨配方組分進行配制.(應附有處方和使用說明,配制時應按使用說明上的要求操作以確保質量符合要求,結塊或顏色發生改變的脫水培養基不得使用.)
      脫水培養基或單獨配方組分應在適當的條件下貯藏,如低溫,干燥和避光,所用的容器應密封,尤其是盛放的容器.商品化的成品培養基除了應附有處方和使用說明外,還應注明有效期,貯藏條件,適用性檢査試驗的質控菌和用途.為保證質量的穩定可靠,各脫水培養基或各配方組分應準確稱量,并要求有一定的精確度.
      配制最常用的溶劑是純化水.應記錄各稱量物的重量和水的使用量.
      配制所用容器不得影響培養基質量,一般為玻璃容器.配制所用的容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗以消除清潔劑和外來物質的殘留.對熱敏感的培養基如糖發酵培養基其分裝容器一般應預先進行滅菌,保證無菌性.
      脫水培養基應完全溶解于水中,再行分裝與滅菌.配制時若需要加熱助溶,應注意不要過度加熱,避免培養基顏色變深.如需要添加其他組分時,加人后應充分混勻.培養基滅菌應按照生產商提供或使用者驗證的參數進行.商品化的成品培養基必須附有所用滅菌方法的資料.
      滅菌一般采用濕熱滅菌技術,特殊培養基可采用薄膜過濾除菌.
      培養基若采用不適當的加熱和滅菌條件,有可能引起顏色變化,透明度降低,瓊脂凝固力或p H 值的改變 .因此,培養基應采用驗證的滅菌程序滅菌,滅菌方法和條件,應通過無菌性試驗和促生長試驗進行驗證.此外,對髙壓滅菌器的蒸汽循環系統也要加以驗證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布.溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導致培養基的過熱,過度滅菌可能會破壞絕大多數的細菌和真菌培養基促生長的質量.滅菌器中培養基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度.因此,應根據滅菌培養基的特性,進行全面的滅菌程序驗證.應確定每批培養基滅菌后的p H 值(冷卻至室溫25℃測定).如果處方中未列出p H 值的范圍,除非經驗證表明培養基的PH值允許的變化范圍很寬,否則,p H 值的范圍不能超過規定值± 0 .2.  
      制成平板或分裝于試管的培養基應進行下列檢查:容器和蓋子不得破裂,裝量應相同,盡量避免形成氣泡,固體培養基表面不得產生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結晶,不得污染微生物等.應檢查和記錄批數量,有效期及無菌檢查.
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