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      微生物培養基技術問答會一

      發布時間:

      2022-11-16

      作者:

      國內培養基供應商


      1.含瓊脂培養基冷卻至25攝氏度后已凝固,如何測定其ph?
      答:有專門的固體培養基pH計,如Radiometer A/S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 .".
       
      8.PH計測培養基的PH好像有比較大的差別,應如何選擇PH計?(效價7.8的培養基我用普通理化室的PH計測定只有7.0左右,不知道是否因為在高溫下測定(含瓊脂)
      答:培養基應冷卻到20攝氏度~25攝氏度才可測量,另外PH計應按時校準.
       
      9.生物指示劑對滅菌設備的性能,滅菌程序的驗證是只驗證一次呢,而后進行定期驗證,如果生物指示劑換批號,是否要重新驗證?
      答:應定期或不定期驗證一次,確保滅菌設備正常.生物指示劑更換批號,不需重新驗證.
       
      10.紫外線滅菌后,需要多久進去操作?
      答:打開通風凈化設備,半小時后可入內操作.
      日水培養皿圖片
      11. 孟加拉培養基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進行培養霉菌和酵母菌?
      答:根據中國藥典,采用玫瑰紅鈉瓊脂.
       
      12.配制PH值7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時有時因為高壓滅菌器滅菌過程溫度過高而導致培養基混濁了,這種情況緩沖液還能用嗎?  
      答:建議按正常溫度滅菌,混濁培養基建議不要使用.
       
      13.培養基在冷藏中形成結晶怎么處理?①銷毀 ②加熱再用 ③待冷卻完用  
      答:建議不要使用
       
      14.融化的培養基為什么不能再冷水中冷卻?
      答:防止受熱不均引起結塊
       
      15.取菌后測PH:(25攝氏度)培養基配制好測PH,取其中一瓶測PH,那這一瓶測完就不能用了,污染了.  
      答:也可在無菌條件下取出適量測ph.
       
      16.配制分裝過程中能否使用不銹鋼鍋?
      答:我實驗室使用不銹鋼鍋,目前未發現異常.
       
      17.對新購進無菌0.9%氯化鈉(500毫升)能否再次滅菌?
      答:能.但包裝完好,購入時間較短的無需滅菌.
       
      18.“要定期對壓力表進行檢定(消毒鍋),檢定周期一般為半年”,這句話怎樣理解,是廠家應半年自己檢一次,還是有計量部門執行?
      答:由計量部門計量,計量后應發有檢定證書.
       
      19.滅菌后,滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開,這段時間是否會造成過度滅菌.
      答:自然冷卻過程已經計算在正常滅菌時間內了,不會造成過度滅菌.
      日水培養皿圖片 二
      20.培養基常規質控有無強制檢定項目?目前我們所做項目有:ph、無菌檢查、生長檢查、是否符合藥典規定?
      答:培養基應按2010版藥典檢查.
       
      21. 培養基所用器具若使用濕熱滅菌,是否必須待干燥后才可以使用?若烘干或其它方法,中間過程怎樣防止微生物污染?
      答:答:如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實驗,不一定要烘干;否則,應干燥后使用,滅菌及干燥盡量在同一鍋里進行,或用紗布和牛皮紙包扎緊密.
       
      22.培養基的避光儲存,是否配置好的培養基其全部放避光儲存?
      答:最好都避光保存.無條件時,光敏感的培養基一定要.
       
      23. 商品培養基干粉說是加蒸餾水溶解,實際操作是否可以用純化水或注射用水?
      答:只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質的水均可.
       
      24.滅菌后的培養基是否都要測ph值?如何測定ph值?
      答:每個制備批次的培養基都應測定ph,可采用ph試紙或ph計測量.
       
      25.培養基及器具滅菌可否同一設備同滅菌時間進行滅菌?答:最好分開滅菌,條件不允許時可同爐滅菌,前提是都是潔凈無污染的.
       
      26.培養基的保溫能否用60攝氏度的培養箱,它與45攝氏度-55攝氏度水浴鍋保溫方法有何不同?
      答:不建議,因為溫度不同,長時間高溫影響培養基質量.
       
      27.培養基的貯存是否需要放置于2-10攝氏度冰箱內?
      答:需冷藏保存的培養基外包裝上會寫明.
       
      28.培養基滅菌后成份會有所蒸發減少,如何處理這個問題?答:正常情況下蒸發量較少,可忽略不計.
       
      29.培養基融化后出現渾濁是有哪些方面的原因引起的?應如何避免?
      答:可能的情況有1培養基配置用水不符合規定;2滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢;3培養基儲存不當;4融化時沸騰時間較長等.
       
      30.準備好的培養基有效期如何驗證?
      答:定期取出培養基驗證其無菌性,促生長能力等方面.
      青島日水培養皿接觸碟圖片 三
      31.某些培養基無pH變化范圍,應該怎么確定該培養基的pH范圍呢?
      答:向培養基供應商索取.
       
      32.用于環境監控的培養基預培養時間如何確定?
      答:與正常實驗的培養時間應一樣.
       
      33.培養基加熱的溫度一般超過100攝氏度,是否符合要求?有無時間限制?
      答:答:是指哪個環節?培養基滅菌溫度規定是超過100攝氏度,有具體的時間要求,如果是指固體培養基使用前的加熱熔化,則完全融化即可,避免長時間高溫加熱.
       
      34."培養基瓶的裝量,例:瓶裝量是500毫升/瓶,裝量超過500毫升/每瓶是否可行?
      答:培養基的分裝量不得超過容器的2/3."
       
      35.同一批培養基代表同一批號生產的培養基嗎?
      答:是.
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