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      實驗室配好的固體培養基再次滅菌能用嗎?

      發布時間:

      2022-11-16

      作者:

      成品培養基廠家


      實驗室配好的固體培養基再次滅菌能用嗎?
       
      二次滅菌有沒有影響?培養基在沒打開前滅菌多少次之后不可以再次用?
       
      培養基加蒸餾水溶解滅菌,但是在無菌瓶里沒開封使用吧,我們公司是滅菌兩次(包括兩次)以內的可以使用,不能第三次滅菌,滅菌完成的培養基要一直存放在冰箱冷藏(但是在冰箱里存放的也要有時間的   還是一周時間內使用,如超出需經過驗證)。最好只滅一次吧,很多培養基滅第二次的時候顏色就變了,比如孟加拉紅,應該就不能用了。
       
      根據相關規定,遵循先進先出的原則,各種試劑及培養基必須在廠家規定的保質期內使用,過期者不得使用。無水培養基貯存在常溫、干燥處。開瓶后需在6個月內使用完畢,超過期限建議丟棄。配置好的培養基,如孤傲紀檢過長,懷疑染菌,可在使用前在室溫下培養過夜。若染菌則丟棄。培養基的重復殺菌次數不超過2次。配好的培養基冷藏儲存,最多可以儲存兩周。
      日水成品培養基圖片
      重復滅菌需要根據分類,像帶染料的培養基你重復滅菌會使顏色變化,不建議重復滅菌,像營養類的培養基可以重復滅菌不超過2次,而且溫度也不能太高,可以設置為115℃,這樣可以最大限度地避免營養流失。可以采用水浴復溶的方式,大約30-40min即可溶解,這個過程需不時地搖晃瓶子。也可用微波爐復溶,不過此法危險,沒有經驗的不提倡使用。
       
      通常情況下培養基是不能兩次滅菌的,一方面培養基里的成分有可能被破壞,另一方面培養基里的水分揮發,會造成平板硬化,對于菌種活化和培養都有影響。所以建議還是重新配制。
       
      如非必須不建議使用,以前實驗室是這樣處理:一次滅菌未使用完畢的培養基存放在錐形瓶中,密封好放置在4℃冰箱中(一般一周左右都會使用完,盡量現用現配),下次使用時放在微波爐內進行加熱,實驗室沒有微波爐的話放在電磁爐上進行加熱,盡量減少滅菌次數,盡量不要重復使用已經滅菌的培養基。
       
      最好還是現配現用,一次用不完的可以放冰箱貯藏,不必再滅菌吧。
      不可以第二次高壓滅菌,可以放水浴中復溶一次,但必須8小時內用完,藥典中有規定的。一般使用自制的培養基都是現配現用的,二次殺菌肯定會對結果有影響,如果你懷疑培養基有污染,建議不要用了,重新配一份最好,又不要多長時間。
      有影響的:發現二次滅菌的營養瓊脂上菌長得不好,而新滅菌的菌長勢不錯,所以感覺還是有影響的。
       
      這個會對PH和營養物質有點影響。就像人,吃飯,咸了會不太舒服,但是還是飽了。對于菌只是可能會稍微影響一下生長速度和形態。你們嚴格的話就重新配置。不嚴格就直接做沒太大關系的。重復滅菌會造成培養基中營養成分的損失,當然滅菌后也能用。如果你的實驗要獲取產物就重配吧,只是培養菌體也能長起來。一般不重復滅菌,影響營養成分,另外,久置的培養基有時候效果不好,建議重新配新鮮的。
       
      當然也有比較嚴謹的情況,配好的培養基應立即進行高壓濕熱滅菌,培養基不能進行二次滅菌。滅菌過的培養基放入冰箱2-10度冷藏保存 最長時間不能超過一月,最好是放置時間越短越好。融化瓊脂等培養基時最多加熱融化二次,第二次融化后未用完就應該舍去。如果沒有特別的要求,最好是重新做一批。這樣就不會影響實驗結果了。如果湊合著用,最終出現不正常的結果,就不好解釋了。
       
      實驗室自制的培養基,在保證其成分不會改變條件下保存,即避光、干燥保存,必要時在5 ℃±3 ℃冰箱中保存,通常建議平板不超過2周~4周,瓶裝及試管裝培養基不超過3個月~6個月,除非某些標準或實驗結果表明保質期比上述的更長。建議需在培養基中添加的不穩定的添加劑應即配即用,除非某些標準或實驗結果表明保質期更長;含有活性化學物質或不穩定性成分的固體培養基也應即配即用,不可二次融化。培養基的貯存應建立經驗證的有效期。觀察培養基是否有顏色變化、蒸發(脫水)或微生物生長的情況,當培養基發生這類變化時,應禁止使用。培養基使用或再次加熱前,應先取出平衡至室溫。
      來自:日水生物qdrishui.cn
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