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      致瀉大腸埃希氏菌套裝生化鑒定管7種

      發布時間:

      2022-11-16

      作者:

      企業生產培養基


      致瀉大腸埃希氏菌套裝生化鑒定管7種(GB 4789)

       
      包含蛋白胨水、半固體瓊脂、氰化鉀、氰化鉀對照、賴氨酸、氨基酸對照、尿素瓊脂、氧化酶、液體石蠟
       
       
      1.氰化鉀試驗
      原理:氰化鉀是細菌呼吸酶系統的抑制劑,可與呼吸酶作用使酶失去活性,抑制細菌的生長,但有的細菌在一定濃度的氰化鉀存在時仍能生長,以此鑒別細菌. 
      試驗方法:取培養18~24h的營養肉湯培養液或菌落1環,接種至對照培養基及氰化鉀培養基內,立即以橡膠塞塞緊,36±1 ℃培養24~ 48h,觀察結果。 
      結果記錄:對照管有菌生長,試驗管有菌生長為陽性。對照管有菌生長,試驗管無菌生長為陰性。
      2.尿素酶實驗
      原理:有些細菌能產生尿素酶,將尿素分解、產生2個分子的氨,使培養基變為堿性,酚紅呈粉紅色。尿素酶是誘導酶,因為不論底物尿素是否存在,細菌均能合成此酶。其活性最適pH為7.0。
      試驗方法:挑取18~24h待試菌培養物穿刺并涂布于瓊脂斜面,不要到達底部,留底部作變色對照。30~35℃培養24h觀察結果。變為粉紅色為陽性。
       
       
      3.三糖鐵(TSI)瓊脂斜面
      本培養基適合于腸桿菌科的鑒定。用于觀察細菌對糖的利用和硫化氫(變黑)的產生。
      原理:該培養基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1,只能利用葡萄糖的細菌,葡萄糖被分解產酸可使斜面變黃,但因量少,生成的少量酸,因接觸空氣而氧化,加之細菌利用培養基中含氮物質,生成堿性產物,故使斜面后來又變紅,底部由于是在厭氧狀態下,酸類不被氧化,所以仍保持黃色。而發酵乳糖的細菌,則產生大量的酸,使整個培養基呈現黃色。如培養基接種后產生黑色沉淀,是因為某些細菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養基中的鐵鹽反應,生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
      試驗方法:挑取18~24h待試菌培養物穿刺并涂布于瓊脂斜面,30~35℃培養24h觀察結果。
      44102:斜面呈黃色,底部培養基破裂
      福氏志賀氏菌:底部黃色,斜面呈紅色
       
      鼠傷寒沙門氏菌:斜面呈黑色,底部培養基破裂
       
       
      4.MUG試驗
      原理:菌的葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下,作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide簡稱MUG)的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。試驗方法:挑取18~24h待試菌培養物穿刺并涂布于瓊脂斜面,30~35℃培養24h觀察結果。
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