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      化妝品中菌落總數的檢查

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:


      化妝品中菌落總數的檢查

      隨著化妝品使用越來越廣泛.已成為人們日常生活中的必需品.開展化妝品衛生質量監測.是保障人民健康維護消費者的利益,如使用了細菌總數超標的化妝品.會導致皮膚感染.因此,化妝品細菌總數測定是便于判明樣品被污染的程度.是對樣品進行衛生學評價的重要依據.
       
      實驗原理
       
      菌落總數是指化妝品檢樣經過處理,并在一定條件下培養后,得到的1克或1毫升檢樣中所含細菌菌落的總數.
      菌落總數的測定(平板活菌計數法)是根據微生物在固體培養基上所形成的菌落(即由一個單細胞繁殖而成,且肉眼可見的子細胞群體)的生理及培養特征進行的.也就是說,一個菌落即代表一個單細胞.
       
      測定時,首先將待測樣品制成均勻的、一系列不同稀釋度的稀釋液,并盡量使樣品中的微生物細胞分散,使之成為單個細胞狀態存在(否則1個菌落就不能代表1個菌);再取一定稀釋倍數的一定量稀釋液接種到培養基上,使其均勻分布.菌落由單個細胞生長繁殖而成,因此通過統計菌落的數目,可計算樣品中的含菌數.
      由于所計算出的菌數是培養基上長出來的菌落數,故不包括死菌,因此菌落總數的測定又稱為活菌計數.
       
      菌落總數可作為判定食品被污染程度的標志,也可用于觀察細菌在食品中繁殖的動態,以便在對被檢樣品進行衛生學評價時提供依據.
      前邊所述的細菌菌落總數實際上僅為樣品中總細菌數的一部分,其余細菌皆因種種原因未能長出.每種細菌都有其一定的生理特性,欲將各種細菌都有培養出來,就必須創造各種不同的培養條件,包括營養、溫度、pH、需氧性等,去滿足各種細菌的要求.在實際工作中,不可能也不必要培養出所有的細菌,所得結果只是能在肉汁營養瓊脂上生長的嗜中溫需氧性的菌落總數.
      儀器設備
       
      培養箱:(36±1).恒溫水浴鍋:(46±1).天平.滅菌廣口瓶或三角瓶:500毫升.滅菌培養皿:皿底直徑9.0.滅菌吸管:1.0、10.1.滅菌小試管.玻璃珠:直徑5.均質機.滅菌刀、剪刀、鑷子.酒精燈.
       
      培養基和試劑
       
      (1)營養瓊脂培養基
      成分:蛋白胨10克瓊脂15至20克牛肉膏3克蒸餾水1000毫升氯化鈉5克pH7.2至7.4
      制法:將除瓊脂以外的各成分溶于蒸餾水中,用15%的NaOHt調節pH使之在7.2至7.4.加入瓊脂,于121下高壓滅菌15分鐘
      (2)生理鹽水
      成分:NaCl0.9克蒸餾水100毫升
      制法:一般每種檢樣配制250毫升無菌生理鹽水.稱取2.2克NaCl,加入250毫升蒸餾水溶解;分裝于2支大試管中,每支9毫升;再量取225毫升裝于500毫升廣口瓶或三角瓶中,并加入適量的玻璃珠;剩余的裝入另1支試管中,包扎后于121下高壓滅菌15分鐘.
      (3)75%的酒精棉球.
      實驗步驟
      化妝品菌落總數檢測圖
      在無菌條件下,將25毫升(或25g)檢樣剪碎,放入裝有225毫升無菌生理鹽水和適量玻璃珠的500毫升廣口瓶或三角瓶內,經充分振搖,形成10-1均勻稀釋液.
      用1毫升的無菌吸管吸取10-1稀釋液1毫升,注入裝有9毫升無菌生理鹽水的試管內,振搖混合均勻,即為10-2稀釋液.再用此吸管吸取10-1稀釋液各1毫升于2個培養皿內.
      另取1毫升的無菌吸管吸取10-2稀釋液1毫升,注入裝有9毫升無菌生理鹽水的試管內,振搖混合均勻,即為10-3稀釋液.再用此吸管吸取10-2稀釋液各1毫升于2個培養皿內.
      采用相同的方法吸取10-3稀釋液各1毫升于2個培養皿內.
      檢樣在36±1下48h后營養瓊脂培養基中細菌的菌落數.
      日水培養基的圖片
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