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      微生物檢驗中的菌種濾片保藏方法和復蘇研究

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:


      菌種的濾紙片保藏法及復蘇

      濾紙片的準備
      用打孔器將濾紙制成直徑約3mm的圓形小紙片,放入普通玻璃小瓶中,121°C高壓滅菌30分鐘后備用.
      菌種的準備
      將需要保存的菌種,在適宜的斜面培養基或平板培養基上培養,使其充分生長.
      菌種保存
      抽真空方法
      (1)取滅菌脫脂牛乳1-2ml滴加在滅菌培養皿或試管內,挑取數環菌苔在牛乳內混勻,制成濃懸液.(2)用滅菌鑷子夾住高壓滅菌后的濾紙片浸入菌懸液內,使其自然吸飽,小心放入滅菌后的菌種保存玻璃瓶內,每瓶至少放置10片,然后蓋上瓶蓋(注意留有小縫隙,不要蓋緊).(3)在玻璃瓶外壁上注明菌種編號、種類、名稱、保存時間等信息.(4)將玻璃瓶放入內有五氧化二磷作吸水劑的干燥器中,用真空泵抽氣至干(如果沒有干燥器,也可直接抽氣至干).(5)將干燥后的裝有菌片的玻璃瓶放置于-20°C及以下低溫冰箱冷凍保存.
      上述濾紙片保存法需要抽真空,如果實驗室不具備抽真空的條件,用如下方法.
      無需抽真空方法
      (1)用無菌小鑷子夾住濾紙片,每片在細菌平板上刮取菌苔,或至少刮取3-5個單菌落,然后將濾紙片放入菌種保存玻璃瓶內,每瓶至少放置10片,然后直接蓋緊瓶蓋.(2)在玻璃瓶外壁上注明菌種編號、種類、名稱、保存時間等信息.(3)將干燥后的裝有菌片的玻璃瓶放置于-20°C及以下低溫冰箱冷凍保存.
      菌種復蘇
      當需要復蘇使用菌種時,從菌種保存玻璃瓶中取出1-2片濾紙片,用少量生理鹽水浸泡后,劃線接種于適宜的固體培養上;或直接將濾紙片放入適宜的液體培養基內,置培養箱中培養.
      濾紙保藏法可應用于細菌、酵母菌、絲狀真菌等的保藏,該法尤其適合一些對營養要求不高的菌種,保藏時間可達2年以上.濾紙保藏法可廣泛應用于大、中、小等各類微生物實驗室.
       
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