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      微生物檢測斜面接種技術操作要點大全

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:


      微生物檢測斜面接種操作要點

       
      一、斜面接種
      步驟1:在肉膏蛋白胨斜面試管上,用記號筆寫上將接種的菌名、日期和接種者.
       
      步驟2:點燃酒精燈或煤氣燈.
       
      步驟3:將菌種試管和待接種的斜面試管,用大拇指和食指、中指、無名指握在左手中,并將中指夾在兩試管之間,使斜面向上,成水平狀態,.在火焰邊用右手松動試管塞,以利于接種時拔出.
       
      步驟4:右手拿接種環通過火焰燒灼滅菌(參照實驗一),在火焰邊用右手的手掌邊緣和小指,小指和無名指分別夾持棉塞(或試管帽),將其取出,并迅速燒灼管口.
       
      步驟5:將滅菌的接種環伸入菌種試管內,先將環接觸試管內壁或未長菌的培養基,達到冷卻的目的,然后再挑取少許菌苔.將接種環退出菌種試管,迅速伸入待接種的斜面試管,用環在斜面上自試管底部向上端輕輕地劃直線,勿將培養基劃破,也不要使環接觸管壁或管口.
       
      步驟6:接種環退出斜面試管,再用火焰燒管口,并在火焰邊將試管塞塞上.將接種環逐漸接近火焰,再燒灼.如果接種環上沾的菌體較多時,應先將環在火焰邊烤干,然后燒灼,以免未燒死的菌種飛濺出污染環境,接種病原菌時更要注意此點.
       
      二、液體培養基接種
      向肉膏蛋白胨液體培養基中接種少量菌體時,其操作步驟基本與斜面接種時相同,不同之處是挑取菌體的接種環放入液體培養基后,應在液體表面處的管內壁上輕輕磨擦,使菌體從環上脫落,混進液體培養基,塞好試管塞后,搖動液體,使菌體在液體中分布均勻,或用試管振蕩器混勻.
       
      向液體培養基中接種量大或要求定量接種時,可將無菌水或液體培養基注入菌種試管,用接種環將菌苔刮下,再將菌種懸液以無菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液體培養基.如果菌種為液體培養物,則可用無菌吸管定量吸出加入或直接倒入液體培養基.整個接種過程都要求無菌操作.
       
      三、穿刺接種
      用接種針挑取菌種(針必須挺直),自培養基的中心垂直地刺入半固體培養基中,直至接近管底,但不要穿透,然后沿原穿刺線將針拔出,塞上試管塞,燒灼接種針.
       
      上述幾種接種法的無菌操作,凡未敘述的均按實驗一操作.試驗者應反復練習無菌操作接種技術,直至較熟練地掌握.
       
      四、將已接種的斜面、液體和半固體培養基放置28-30溫箱,培養2—3天后取出觀察結果.
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