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      菌種保藏及活化使用的注意事項

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:


      菌種保藏及活化使用的注意事項

      菌種保藏的方法很多,但原理大同小異.首先要挑選優良純種.利用微生物的孢子、芽孢及營養體;其次,根據其生理、生化性,人為創造低溫、干燥或缺氧等條件,抑制微生物的代謝作用,使其生命活動降低到極低的程度或處于休眠狀態,從而延長菌種生命以及使菌種保持原有的形狀,防止變異.不管采用哪種保藏方法,在菌種保存過程中要求不死亡、不污染雜菌和不退化.
      短期:斜面保藏
       
      斜面保藏
      斜面保藏是目前最普遍的短期保藏法,操作簡單,使用方便,但需定期接種.因此工作量較大,而且傳代次數多易發生變異,因此,僅適用于短期經常使用的菌種.
      步驟1.配制培養基,營養成分濃度稍低為宜,特別是糖類盡可能降低,產酸菌種,則應添加少量碳酸鈣;
      步驟2.斜面裝液量,斜面以傾斜后不超過試管長度1/2為宜;
      步驟3.斜面培養,溫度較最適稍低,時間較最適略長;
      步驟4.生長完成后,密封置于2~8的冰箱中保藏.每傳代一次,霉菌、放線菌及有芽孢的細菌可保存1~3個月,酵母菌2個月,細菌1個月.
       
      活化使用:
      將斜面從冰箱中取出,細菌挑取菌落增菌,或霉菌切塊傳代培養,培養好即可使用.
      長期:冷凍保藏
       
      冷凍保藏
      冷凍保藏是目前使用較為廣泛的長期保藏法之一,適用于所各類微生物,較之于斜面保藏,減少了工作量,延長了保藏時間.
      步驟1.準備斜面或平板新鮮培養物一個,10%的無菌甘油溶液;
      步驟2.用甘油溶液將菌體或孢子洗脫下來,形成菌懸液;
      步驟3.菌懸液分裝,凍存管裝液1mL/支,后置于程序降溫盒;
      步驟4.將程序降溫盒置于-80冰箱凍存;
      步驟5.可保藏1-2年.
       
      活化使用:
      步驟1.將凍存菌株置于凍存盒中取出,準備水浴溶解,切勿常溫融化;
      步驟2.將菌株迅速置于水浴速溶,細菌40,真菌30,約2min全部溶解后接種到適宜培養基;步驟3.采用適宜條件培養完成即可.
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