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      控制菌檢查:白色念珠菌

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:

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      控制菌檢查:白色念珠菌

       
      1.供試液的制備和增菌培養
      取供試品,按照“非無菌產品微生物限度檢查制成1:10供試液”.取相當于1g或1毫升供試品的供試液,接種至適宜體積(經方法適用性實驗確定的)沙氏葡萄糖液體培養基中,混勻,30至35攝氏度培養3至5天.
       
      2.選擇和分離培養
      取上述培養物劃線接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上,30至35攝氏度培養24至48小時.
       
      3.白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養基上生長的菌落呈乳白色、偶見淡黃色,表面光滑有濃酵母氣味,培養時間稍久則菌落增大,顏色變深,質地變硬或有褶皺,挑取疑似菌落接種至念珠菌顯色培養基平板上,培養24-48小時(必要時延長至72h),或采用其他適宜方法進一步鑒定.
       
      4結果判斷
      若沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上有疑似菌落生長,且疑似菌在念珠顯色培養基平板上生長的菌落呈陽性反應,應進一步進行適宜的鑒定試驗,確證是否為白色念珠菌,若沙氏葡萄糖瓊脂平板上沒有菌落生長,或疑似菌在念珠顯色培養基平板上生長的菌落呈陰性反應,判供試品未檢出白色念珠菌.
       
       
      5相關產品配方
      5.1沙氏葡萄糖液體培養基
      (動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物)10.0g
      (葡萄糖)20.0g
      pH5.6±0.2(25攝氏度)
      5.2沙氏葡萄瓊脂培養基
      (動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物)10.0g
      Dextrose(葡萄糖)40.0g
      Agar(瓊脂)15.0g
      pH5.6±0.2(25攝氏度)
       
      原理:葡萄糖提供碳源;動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物提供氮源;瓊脂是培養基的凝固劑.
      5.3沙氏葡萄糖液體培養基適用性檢查
      分別接種不大于100cfu的白色念珠菌于被檢培養基和對照培養基中,在30-35攝氏度培養短于72h,與對照培養基管比較,被檢培養基管試驗菌生長良好.
      5.4.1培養基促生長能力檢查:用涂布法分別接種不大于100cfu的白色念珠菌于沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上,在不超過24h30至35攝氏度培養下,白色念珠菌在被檢培養基上生長的菌落大小、形態特征應與對照培養基一致.
      5.4.2用涂布法分別接種不大于100cfu的白色念珠菌于沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上,在不超過24h30至35攝氏度培養下,白色念珠菌在被檢培養基上生長的菌落大小、形態特征、指示劑反應情況等應與對照培養基一致.
      5.4.3沙氏葡萄糖瓊脂培養基在“微生物計數限度檢查法”,接種白色念珠菌和黑曲霉不大于100cfu,培養溫度20-25攝氏度,培養基時間不超過5天,被檢固體培養基上的菌落平均數與對照培養基上的菌落平均數的比值應在0.5-2范圍內,且菌落形態大小應與對照培養基上的菌落一致.
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