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      金黃色葡萄球菌定義及檢驗方法

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:

      培養基平皿廠家水監測


      金黃色葡萄球菌定義及檢驗方法
       
      主題內容與適用范圍
      本文規定了食品中金黃色葡萄球菌的檢驗方法.
      本文適用于航空食品的檢驗.
       
      設備和材料
      吸管(1毫升、10毫升)、恒溫培養箱(36±1攝氏度)、冰箱、均質器、振蕩器、平皿、稀釋瓶、天平、顯微鏡、接種棒等
       
      培養基和試劑
      普通肉湯培養基、胰蛋白胨大豆肉湯、Baird-Prker瓊脂平板、緩沖蛋白胨水(BP)、培養基的圖片凝固酶試驗凍干血漿
       
      檢驗程序(非選擇性增菌法)
       
      金黃色葡萄球菌檢驗程序如下:
      檢樣25g+225毫升BP胨水
      10毫升勻液+10毫升雙料胰胨肉湯
      上述混合液+20毫升20%NaCl單料胰胨肉湯
      36±1攝氏度2h
      B-P平板
      36±1攝氏度24h
      36±1攝氏度48h
      挑可疑菌落,移種到肉湯培養基
      36±1攝氏度24h
      觀察溶血
      涂片染色
      凝固酶試驗
      報告
       
      操作步驟
      稱取25g固體樣品;吸取25毫升液體樣品,加入225毫升BP胨水,固體樣品研磨或置均質器中制成混懸液.
      吸取10毫升上述混懸液,接種于10毫升雙料胰蛋白胨大豆肉湯中,置36±1攝氏度培養2小時.
      再加入20毫升含20%NaCl的單料胰蛋白胨大豆肉湯,置36±1攝氏度培養24±2小時.
      劃線轉種2個表面干燥的Baird-Parker瓊脂平板上,36±1攝氏度培養46±2小時.
      挑取可疑菌落移種到肉湯培養基中,置36±1攝氏度溫箱培養24小時.
      取肉湯培養物0.3毫升同0.5毫升凝固酶試驗凍干血漿于8毫米*100毫米試管內充分混合,置36±1攝氏度培養,定時觀察是否有凝塊形成,至少觀察6h,以內容物完全凝固,使試管倒置或傾斜時不流動為陽性.試驗中需同時做已知陽性和陰性對照.對可疑結果,應進行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗.
      本菌為革蘭氏陽性球菌,排列是葡萄球狀,無芽胞,無莢膜,致病性葡萄球菌菌體較小,直徑約為0.5~1μm.在Baird-Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤、直徑為2~3毫米,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周圍為一混濁帶,在其外層有一透明圈.用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度,偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落;但無混濁帶及透明圈.
      報告結果
       
      如發現有凝固酶試驗陽性的菌落,即報告1g(毫升)食品中有金黃色葡萄球菌存在,否則為陰性.
      注:本文參照SN0172-92《出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法》
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