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      銅綠假單胞菌的檢查技術

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:

      即用型培養基采購批發


      銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的檢查

      (1)增菌培養稱取供試品1g,加到9毫升的NAC液體培養基中,培養18至24小時.NAC液體培養基的圖片
      (2)特異培養將上述增菌液搖勻,取0.1毫升滴加到NAC瓊脂平皿上,以玻棒涂勻,一式3份,培養18至24.小時,觀察菌落生長情況.
      (3)結果判定
      陽性對照平皿應長出產綠色色素的菌落,可使整個培養基呈綠色.
      如平皿上無菌落生長或生長的菌落與陽性對照菌落形態特征不符,判供試品未檢出銅綠假單胞菌;如平皿生長的菌落與上述菌落形態特征相符或疑似,應挑選2至3個菌落,分別接種于營養瓊脂培養基斜面上,培養18至24小時.取斜面培養物進行革蘭氏染色、鏡檢及氧化酶試驗,鑒別是否為制品中的目的菌或銅綠假單胞菌.
       
      氧化酶試驗
      取潔凈濾紙片置于平皿內,用無菌玻棒取斜面培養物涂于濾紙片上,滴加新配制的1%二鹽酸二甲基對苯二胺試液,在30秒內若培養物呈粉紅色并逐漸變為紫紅色為氧化酶試驗陽性,否則為陰性.
      若斜面培養物為非革蘭氏陰性無芽孢桿菌或氧化酶試驗陰性,均判供試品未檢出銅綠假單胞菌.否則,應進行綠膿菌素試驗.
       
      綠膿菌素(Pyocyanin)試驗
      取斜面培養物接種于PDP瓊脂培養基斜面上,培養24小時,加三氯甲烷3至5毫升至培養管中,攪碎培養基并充分振搖.靜置片刻,將三氯甲烷相移至另一試管中,加入1mol/L鹽酸試液約1毫升,振搖后,靜置片刻,觀察.若鹽酸溶液呈粉紅色,為綠膿菌素試驗陽性,否則為陰性.同時用未接種的PDP瓊脂培養基斜面同法作陰性對照,陰性對照試驗應呈陰性.
      若上述疑似菌為革蘭氏陰性桿菌、氧化酶試驗陽性及綠膿菌素試驗陽性,判供試品檢出銅綠假單胞菌;若上述疑似菌為革蘭氏陰性桿菌、氧化酶試驗陽性及綠膿菌素試驗陰性,應繼續進行適宜的鑒定試驗,確認是否為銅綠假單胞菌.
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