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      培養基的制備貯藏和質量控制

      發布時間:

      2022-12-27

      作者:

      青島培養基生產企業


      培養基的制備貯藏和質量控制
       
      培養基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物試驗結果.適宜的培養基制備方法、貯藏條件和質量控制試驗是提供優質培養基的保證.
       
      微生物實驗室使用的培養基可按處方配制,也可使用按處方生產的符合規定的脫水培養基.
      在制備培養基時,應選擇質量符合要求的脫水培養基或按單獨配方組分進行配制.(脫水培養基應附有處方和使用說明,配制時應按使用說明上的要求操作以確保培養基的質量符合要求,結塊或顏色發生改變的脫水培養基不得使用.)
      脫水培養基或單獨配方組分應在適當的條件下貯藏,如低溫、干燥和避光,所用的容器應密封,尤其是盛放脫水培養基的容器.商品化的成品培養基除了應附有處方和使用說明外,還應注明有效期、貯藏條件、適用性檢査試驗的質控菌和用途.為保證培養基質量的穩定可靠,各脫水培養基或各配方組分應準確稱量,并要求有一定的精確度.
      配制培養基最常用的溶劑是純化水.應記錄各稱量物的重量和水的使用量.
      配制培養基所用容器不得影響培養基質量,一般為玻璃容器.培養基配制所用的容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗以消除清潔劑和外來物質的殘留.對熱敏感的培養基如糖發酵培養基其分裝容器一般應預先進行滅菌,保證培養基的無菌性.
      脫水培養基應完全溶解于水中,再行分裝與滅菌.配制時若需要加熱助溶,應注意不要過度加熱,避免培養基顏色變深.如需要添加其他組分時,加人后應充分混勻.培養基滅菌應按照生產商提供或使用者驗證的參數進行.商品化的成品培養基必須附有所用滅菌方法的資料.
      培養基滅菌一般采用濕熱滅菌技術,特殊培養基可采用薄膜過濾除菌.
      培養基若采用不適當的加熱和滅菌條件,有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變.因此,培養基應采用驗證的滅菌程序滅菌,培養基滅菌方法和條件,應通過無菌性試驗和促生長試驗進行驗證.此外,對髙壓滅菌器的蒸汽循環系統也要加以驗證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布.溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導致培養基的過熱,過度滅菌可能會破壞絕大多數的細菌和真菌培養基促生長的質量.滅菌器中培養基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度.因此,應根據滅菌培養基的特性,進行全面的滅菌程序驗證.應確定每批培養基滅菌后的pH值(冷卻至室溫25℃測定).若培養基處方中未列出pH值的范圍,除非經驗證表明培養基的pH值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規定值±0.2.
      制成平板或分裝于試管的培養基應進行下列檢查:容器和蓋子不得破裂,裝量應相同,盡量避免形成氣泡,固體培養基表面不得產生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結晶,不得污染微生物等.應檢查和記錄批數量、有效期及培養基的無菌檢查.
       

      2.培養基的貯藏

      自配的培養基應標記名稱、批號、配制日期、制備人等信息,并在已驗證的條件下貯藏.商品化的成品培養基標簽上應標有名稱、批號、生產日期、失效期及培養基的有關特性,生產商和使用者應根據培養基使用說明書上的要求進行貯藏,所采用的貯藏和運輸條件應使成品培養基最低限度的失去水分并提供機械保護.培養基滅菌后不得貯藏在髙壓滅菌器中,瓊脂培養基不得在0℃或0℃以下存放,因為冷凍可能破壞凝膠特性.培養基保存應防止水分流失,避光保存.瓊脂平板最好現配現用,如置冰箱保存,一般不超過1周,且應密閉包裝,若延長保存期限,保存期需經驗證確定.固體培養基滅菌后只允許1次再融化,避免因過度受熱造成培養基質量下降或微生物污染.培養基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱,若采用其他溶解方法,應對其進行評估,確認該溶解方法不影響培養基質量.融化的培養基應置于45?50℃的環境中,不得超過8小時.使用過的培養基(包括失效的培養基)應按照國家污染廢物處理相關規定進行.
      日水培養基90mm平板產品圖片

      3.培養基的質量控制試驗

      實驗室應制定試驗用培養基的質量控制程序,確保所用培養基質量符合相關檢査的需要.實驗室配制或商品化的成品培養基的質量依賴于其制備過程,采用不適宜方法制備的培養基將影響微生物的生長或復蘇,從而影響試驗結果的可靠性.所有配制好的培養基均應進行質量控制試驗.實驗室配制的培養基的常規監控項目是pH值、適用性檢査試驗,定期的穩定性檢查以確定有效期.培養基在有效期內應依據適用性檢査試驗確定培養基質量是否符合要求.有效期的長短取決于在一定存放條件下(包括容器特性及密封性)的培養基其組成成分的穩定性D除藥典附錄另有規定外,在實驗室中,若采用已驗證的配制和滅菌程序制備培養基且過程受控,那么同一批脫水培養基的適用性檢査試驗可只進行1次.如果培養基的制備過程未經驗證,那么每一滅菌批培養基均要進行適用性檢査試驗.試驗的菌種可根據培養基的用途從相關附錄中進行選擇,也可增加生產環境及產品中常見的污染菌株.
      培養基的質量控制試驗若不符合規定,應尋找不合格的原因,以防止問題重復出現.任何不符合要求的培養基均不能使用.用于環境監控的培養基須特別防護,最好要雙層包裝和終端滅菌,如果不能采用終端滅菌的培養基,那么在使用前應進行100%的預培養,以防止外來的污染物帶到環境中及避免出現假陽性結果.
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